ДПБС вс ПБС
ПБС, физиолошка отопина пуферирана фосфатима и Дулбеццова физиолошка отопина са фосфатом (ДПБС) су пуферирани физиолошки отопини који се користе у биолошким истраживањима. ПБС и ДПБС се користе у истраживањима која укључују ћелије. Концентрација јона и осмоларност раствора су изотонични, односно компатибилни су с телом човека. Пуфер омогућава обезбеђивање и очување стабилног пХ од 7,2-7,6.
Нема значајне разлике између ПБС и ДПБС. Обе садрже натријум-фосфат, натријум-хлорид, а по потреби и калијум-фосфат и калијум хлорид. Остали препарати, попут ДПБС, могу или не садрже калцијум и магнезијум. ПБС и ДПБС имају бројне апликације јер нису штетне за ћелије. И ПБС и ДПБС се могу користити за испирање инструмената или контејнера контаминираних ћелијама. Такође, обе се могу користити у разређивању супстанци. Молекули воде у оквиру разблаживача попут протеина заустављају се и суше. Вода која се комбинује са супстанцом спречава супстанцу да поднесе конформацијске преинаке попут денатурације. Раствори калцијума и магнезијума могу да обуздају активност трипсина. У елипсометрији, адсорпција протеина се може мерити узимањем основног спектра уз употребу ПБС-а.
Физиолошка отопина пуферирана фосфатима са додацима као што је ЕДТА може се користити за одвајање везаних ћелија. Таложење настаје када се цинк, двовалентни метал, дода у ПБС, због чега се не може додати да одвоји ћелије. Добри пуфер се користи уместо цинка у овој врсти ситуације.
Физиолошка отопина пуферирана фосфатима и Дулбеццова физиолошка отопина са фосфатом припремљена су на бројне начине. Један начин да се припреми је растварањем 800 г. натријум хлорид, 20 г. калијум хлорида, 2 молекула воде, 24 г. калијум-фосфата и 144 г. натријум-фосфат у 8 Л. дестиловане воде. Исход ће бити 10 литара 10к ПБС. Директно измерите пХ вредности ПБС помоћу пХ метра за припрему пуферираних раствора. ПХ раствора може се подесити коришћењем натријум хидроксида или хлороводоничне киселине. Физиолошка отопина пуферирана фосфатима као разблаживач припрема се са закључном концентрацијом од 10 мМ фосфата, 137 мМ натријум хлорида, 2,7 мМ калијум хлорида и пХ 7,4. Фритсцх, Самброок и Маниатис имају свој начин припреме пуферних рјешења у својој књизи под називом "Молекуларно клонирање". Сходно томе, за литру 1к ПБС-а започети припрему са 800 мл. воде која је дестилована. Укључите 8 г. натријум-хлорида, као и 0,2 г. калијум хлорида. 1,44 г. затим је додат натријум-фосфат, а затим 0.24 г. калијум фосфата. Ставити у хлороводоничну киселину да би се пХ подесио на 7,4. Да бисте добили 1 литар ПБС-а, додајте још дестиловане воде до изравнавања до 1 литра. Излијте добијени раствор у аликвоту и користите аутоклав за стерилисање раствора. Подесите аутоклав на 121 ° Ц и аутоклавите га током 20 минута у свом течном циклусу. Након тога, раствор чувајте на собној температури.
Иако се физиолошка отопина пуферирана фосфатима и Дулбеццова физиолошка отопина са фосфатима припремају се на више начина, садржај је и даље исти. Стога, без обзира на то како се припрема, резултати и употреба су и даље исти.
Резиме:
1.ПБС, физиолошка отопина пуферирана фосфатима и Дулбеццова физиолошка отопина са фосфатом (ДПБС) су пуферирани физиолошки отопини који се користе у биолошким студијама.
2. Концентрација и осмоларност јона раствора су изотонични, односно компатибилни су с људским телом. Пуфер омогућава обезбеђивање и очување стабилног пХ од 7,2-7,6.
3. Не постоји значајна разлика између ПБС и ДПБС. Обе садрже натријум-фосфат, натријум-хлорид, а по потреби и калијум-фосфат и калијум хлорид. Остали препарати, попут ДПБС, могу или не садрже калцијум и магнезијум.
4.Блаки ПБС и ДПБС могу се користити за испирање инструмената или контејнера контаминираних ћелијама. Такође, обе се могу користити у разређивању супстанци. Молекули воде у оквиру разблаживача попут протеина заустављају се и суше. Вода која се комбинује са супстанцом спречава супстанцу да поднесе конформацијске преинаке попут денатурације. Раствори калцијума и магнезијума могу да обуздају активност трипсина. У елипсометрији, адсорпција протеина се може мерити узимањем основног спектра уз употребу ПБС-а.
5. Физиолошки отопљени пуфер са фосфатима са додацима као што је ЕДТА може се користити за одвајање ћелија у пакету. Таложење настаје када се цинк, двовалентни метал, дода у ПБС, због чега се не може додати да одвоји ћелије. Добри пуфер се користи уместо цинка у овој врсти ситуације.
6.ПБС и ДПБС се припремају на бројне начине. Иако се физиолошка отопина пуферирана фосфатима и Дулбеццова физиолошка отопина са фосфатима припремају се на више начина, садржај је и даље исти. Стога, без обзира на то како се припрема, резултати и употреба су и даље исти.