Разлика између директне и индиректне имунофлуоресценције

Тхе кључна разлика Између директне и индиректне имунофлуоресценције је да директна имунофлуоресценција користи једно антитело које делује против циљаног циља док индиректна имунофлуоресценција користи два антитела да означе циљ који занима.

Имунофлуоресценција или снимање ћелија је техника која се користи за означавање специфичног циљног антигена флуорофором. Овде је флуорофор флуоресцентно хемијско једињење које може поново да емитује светлост након побуђења светлости. Кад се флуорофор веже са циљаним антигеном, он омогућава детекцију циљне молекуле у узорку. Да бисмо га додатно описали, када се антиген веже са специфичним антителом, може се коњуговати са флуорофорима. Отуда је лако детектовати присуство циљаног антигена у узорку када се посматра под флуоресцентним микроскопом.

Поред тога, постоје две врсте имунофлуоресценције; директна и индиректна имунофлуоресценција. Разлика између директне и индиректне имунофлуоресценције углавном лежи у броју примењених антитела и коњугацији флуорофора. То јест, у директној имунофлуоресценцији, флуорофор се директно коњугује са примарним антителом, док се у индиректној имунофлуоресценцији, флуорофор коњугира са секундарним антителом.

САДРЖАЈ

1. Преглед и кључне разлике
2. Шта је директна имунофлуоресценција
3. Шта је индиректна имунофлуоресценција
4. Сличности између директне и индиректне имунофлуоресценције
5. Упоредна упоредба - Директна вс индиректна имунофлуоресценција у табеларном облику
6. Резиме

Шта је директна имунофлуоресценција?

Имунофлуоресценција користи антитела за детекцију специфичних циљних антигена. Директна имунофлуоресценција је једна од две врсте имунофлуоресценције. У директној имунофлуоресценцији, једно антитело (примарно антитело) укључује и флуорофор директно се коњугује са примарним антителом. Након везивања антитела са циљаним антигеном, флуорофор отпушта флуоресценцију која се може открити флуоресцентним микроскопом.

Слика 01: Директна имунофлуоресценција

Међутим, директна имунофлуоресценција је скупа метода јер су примарна коњугована антитела скупа у поређењу са секундарним антителима. Ипак, то не подразумева додатни корак стога, краћу технику. Даље, неспецифична везивања су смањена у директној имунофлуоресценцији. Дакле, унакрсна реактивност врста је мала. Али у детекцији је осетљивост директне имунофлуоресценције слаба у поређењу са индиректном имунофлуоресценцијом .

Шта је индиректна имунофлуоресценција?

Индиректна имунофлуоресценција је друга врста имунофлуоресценције која укључује две врсте антитела, као што су примарна и секундарна антитела у обележавању циљног антигена. У овој методи, флуорофор се коњугује са секундарним антителом. Дакле, ова техника укључује додатни корак.

Слика 02: Имунофлуоресценција

Међутим, код ове методе је осетљивост велика јер се неколико флуорофора може коњуговати са секундарним антителима и олакшава откривање. Поред тога, индиректна имунофлуоресценција је јефтинија због чињенице да је коњугација секундарних антитела јефтинија и лакша. У поређењу са директном имунофлуоресценцијом, унакрсна реактивност врста је висока код индиректног поступка.

Које су сличности између директне и индиректне имунофлуоресценције?

• То су две врсте имунофлуоресцентне технике.
• Примарна антитела и флуорофор укључују обе методе.
• Такође, реакција антиген-антитело се дешава у обе методе.
• Поред тога, и директна и индиректна имунофлуоресценција користе флуоресцентни микроскоп за детекцију антигена.

Која је разлика између директне и индиректне имунофлуоресценције?

Имунофлуоресценција може бити директна или индиректна заснована на коњугацији флуорофора са коришћеним антителом. У директној имунофлуоресценцији, флуорофор се коњугује са примарним антителом, што је јединствено антитело које укључује ову технику. Супротно томе, у индиректној имунофлуоресценцији, флуорофор се коњугује са секундарним антителом, што је једно од две врсте антитела која укључују у технику. Отуда, главна разлика између директне и индиректне имунофлуоресценције је врста антитела које се коњугује са флуорофором.

Следећа инфографска слика пружа упоредну разлику разлике између директне и индиректне имунофлуоресценције.

Преглед - Директна вс индиректна имунофлуоресценција

Имунофлуоресценција је техника која се користи за откривање присуства специфичних антигена у узорку. Овом техником се користе специфична антитела. Због тога се антитела коњугирају са флуорофорима да би се детектовала помоћу флуоресцентног микроскопа. Штавише, постоје две врсте имунофлуоресценције, наиме, директна и индиректна имунофлуоресценција. Директна имунофлуоресценција укључује једно антитело и флуорофор директно коњугиран на ово антитело. Индиректна имунофлуоресценција укључује два антитела; примарни и секундарни и флуорофор коњуговани са секундарним антителом. Пошто се неколико секундарних антитела могу везати с примарним антителом и неколико флуорофора може коњугирати са секундарним антителом, индиректна имунофлуоресценција је осетљивији метод од директног. Надаље, индиректна метода је јефтинија од директне. Дакле, ово је разлика између директне и индиректне имунофлуоресценције.

Референце:

1. "Имунофлуоресценција." Википедиа, Фондација Викимедиа, 19. августа 2018. Доступно овде 

Љубазношћу слике:

1. "ХСП ИФ ИгА" Еммануелм са ен.википедиа, (ЦЦ БИ 3.0) преко Цоммонс Викимедиа
2. „Имунофлуоресценција“ аутор Вестхаил618 - сопствени рад, (ЦЦ БИ-СА 4.0) преко Цоммонс Викимедиа