Полимерна ланчана реакција (ПЦР) је метода амплификације ДНА која се користи у Молекуларно биолошкој примени. То је уобичајена техника која прави милионе до милијарде примерака посебно заинтересоване секвенце ДНК. То је ин витро метода која се изводи у лабораторијама. ПЦР техника потпуно зависи од комерцијално произведене ДНК полимеразе која се назива Так полимераза. Такође захтева неколико других компоненти и правилно одржавање температуре. Једна важна компонента су прајмери. Прајмери су кратке ДНК секвенце посебно дизајниране за циљану ДНК секвенцу. Обично су у дужини од око 20 нуклеотида. Так полимераза катализира додавање нуклеотида у постојећу нуклеотидну секвенцу. Отуда, прајмери служе као полазиште синтезе нових нити. Так полимераза делује само у правцу 5 'до 3', стога се синтеза ДНК одвија у истом 5 'до 3' правцу. Пошто је ДНК дволанчана, у ПЦР су потребне две врсте прајмера. Познати су као прајмер и обрнути прајмер. Предњи и реверзни прајмери се називају на основу правца продужења примера у ДНК када се догоди синтеза ДНК. Напредни прајмер се пере са антисенс ДНК ланцем и започиње синтезу + ве лана гена у правцу 5 'до 3'. Обрнути прајмер испере се са смислом и започиње синтезу комплементарног ланца кодирајућег ланца; који је -венац гена у 5 'до 3' правцу. Ово је кључна разлика између правог и обрнутог прајмера.
1. Преглед и кључне разлике
2. Шта је Форвард Пример
3. Шта је обрнути пример
4. Сличности између Форвард и Реверсе Пример
5. Упоредна упоредба - Напред према повратном премазу у табеларном облику
6. Резиме
Напредна оријентација је синтеза кодирајућег ланца или осећајног ланца гена. Так полимераза катализира синтезу новог нити у правцу 5 'до 3'. Синтеза кодирајућег ланца настаје када прајмер одлежи некодизираним или антисенским ланцем и продужује се у правцу 5 'до 3'.
Слика 01: Напријед и обрнуто прајмери
Прајмер који аннесира са антисенс ланцем или некодирајућим ланцем или шаблонским праменом познат је као предњи прајмер јер предњи прајмер делује као полазна основа за синтезу кодирања или позитивног ланца гена. Напредни прајмер има кратку нуклеотидну секвенцу која је комплементарна 3 'бочном крају антисенс ланца. Хибридизира се с антисенским ланцем и олакшава Так полимеразом додавање нуклеотида који су комплементарни ланцу шаблона..
Обрнути прајмер је кратка ДНК секвенца која сажима 3 'крај осећајне нити или кодирајућег ланца. Обрнути прајмер служи као полазна основа за синтезу комплементарног низа кодирајуће секвенце или некодирајуће секвенце. Обрнути прајмер је дизајниран комплементарно 3 'крају кодирајућег низа. Отуда он исијава са бочног 3 'краја кодирајућег ланца и омогућава Так полимерази да синтетише антисенсе трак или прамен шаблона. Пошто је оријентација обрнута, овај прајмер је означен као обрнути прајмер.
И обрнути и напријед прајмери су важни за производњу милиона до милијарди копија одређених региона ДНК који су циљани или заинтересовани.
Форвард Пример вс Реверсе Пример | |
Напредни прајмер је кратка ДНК секвенца која се хибридизира са 3 'крајем некодирајућег или шаблонског низа гена и служи као почетна тачка за синтезу кодирајуће секвенце. | Обрнути прајмер је кратка ДНК секвенца која се хибридизира са 3 'концем кодирања или нетемплатирани низ и служи као полазна тачка за синтезу некодирајуће секвенце. |
Аннеалинг Странд | |
Предња примера за пеглање са праменом шаблона. | Обрнути темељни премаз за очвршћавање са жицом без обраде. |
Резултат нове секвенце | |
Напредни прајмер олакшава синтезу кодирајуће секвенце. | Обрнути прајмер олакшава синтезу некодирајуће секвенце. |
Постоје две врсте прајмера који су укључени у ПЦР технику. То су почетни и обрнути прајмери. На основу продужења примера у синтези нових ДНК ланаца, ови прајмери су обележени или именовани. Так полимераза синтетише нову ДНК у 5 'до 3' оријентацији. Стога су прајмери обликовани као комплементарни 3-крајни крајеви двоструких нити. Напредни прајмер који се продужава у 5 'до 3' правцу хибридизира са 3 'крајем антисенсе или шаблоном или некодирајућом секвенцом. Служи као полазна основа за синтетизацију кодирајуће секвенце. Обрнути прајмер који се продужава у 5 'до 3' правцу хибридизира са 3 'концем кодирања или нетемплатом или смислом. Она служи као почетна тачка за синтетизацију некодирајуће секвенце. Ово је разлика између правог и обрнутог прајмера.
1. „Пример (Молекуларна биологија).“ Википедиа, Фондација Викимедиа, 20. фебруара 2018. Доступно овде
2. "Ланчана реакција полимеразе (ПЦР)." Академија Кан. Доступно овде
1.'Примерс РевЦомп Мелтед2'Би Рицхард Вхеелер (Зепхирис) - сопствени рад, (ЦЦ БИ-СА 3.0) преко Цоммонс Викимедиа