Разлика између имунофлуоресценције и имунохистохемије

Кључна разлика - Имунофлуоресценција против имунохистохемије
 

Дијагностика болести, која користи молекуларно-биолошке методе, постала је ново подручје клиничке лабораторијске технологије. То укључује све тестове и методе за препознавање болести и разумевање узрока болести анализом ДНК, РНК или експресираних протеина у организму. Брзи напредак у молекуларној дијагностици омогућио је основна истраживања о заразним и незаразним болестима. Они се користе за одређивање промена у секвенци или нивоу експресије у кључним генима или протеинима који су укључени у болест. Имунофлуоресценција (ИФ) и имунохистохемија (ИХЦ) су две такве широко коришћене технике у биологији карцинома. ИФ је врста ИХЦ-а где се користи метода детекције флуоресценције за анализу моноклонских и поликлоналних антитела, док ИХЦ користи хемијске методе за детекцију моноклонских и поликлонских антитела.. Ово је кључна разлика између ИФ и ИХЦ.

САДРЖАЈ

1. Преглед и кључне разлике
2. Шта је имунофлуоресценција 
3. Шта је имунохистохемија
4. Сличности између имунофлуоресценције и имунохистохемије
5. Упоредно упоређивање - Имунофлуоресценција против имунохистохемије у табеларном облику
6. Резиме

Шта је имунофлуоресценција (ИФ)?

Имунофлуоресценција је техника детекције где су антитела која се користе у тесту обележена коришћењем флуоресцентних боја или флуоресцентних протеина у сврху детекције. Означена секундарна антитела могу резултирати нежељеним позадинским сигналима; према томе, ИФ техника се заснива на обележавању самог примарног антитела тренутно како би се избегли нежељени сигнали током детекције. Овом техником спречено је неспецифично везање између примарног и секундарног антитела и оно је брже јер није укључен ни секундарни корак инкубације. Квалитет података је такође побољшан.

Слика 01: Двоструко имунофлуоресцентно бојење за БрдУ, НеуН и ГФАП

Флуорохроми или флуоресцентна бојила су једињења која могу да апсорбују радијацију, пожељно ултра-љубичасто зрачење. Када честице достигну основно стање из побуђеног стања, оне емитују зрачење које детектор зароби и детектује да формира спектар. Од велике је важности да флуоресцентна налепница буде компатибилна и стабилна за одређену реакцију и да је треба правилно коњугирати са антителом како би се добили тачни резултати. Један од најчешће коришћених флуорохрома је флуоресцеин изотиоцијанат (ФИТЦ), који је зелене боје, са таласним дужинама таласних таласних дужина од 490 нм и 520 нм, респективно. Родамин, друго средство које се користи у ИФ-у, је црвене боје и има изражене таласне дужине таласних апсорпција и емисија од 553 нм и 627 нм.

Шта је имунохистохемија (ИХЦ)?

ИХЦ је молекуларна метода испитивања која се практикује да би се идентификовало и потврдило присуство антигена у циљној ћелији. Циљна ћелија може бити инфективна честица, микробни патоген или малигна ћелија тумора. ИХЦ користи моноклонска и поликлонска антитела да би утврдио присуство антигена присутних на ћелијској површини циљних ћелија. Техника је заснована на везивању антиген-антитело. Маркер детекције коњугује са овим антителом да би се открило присуство или одсуство одређеног антигена. Ови маркери могу бити хемијски маркери као што су ензими, флуоресцентно обележена антитела или радио-обележена антитела.

Слика 02: Кришка миша и мозга обојена имунохистохемијом

Најпопуларнија примена ИХЦ-а је у биологији ћелија рака да би се утврдило присуство малигних тумора, али се такође користи за откривање заразних болести..

Које су сличности између имунофлуоресценције и имунохистохемије?

• Имунофлуоресценција и имунохистохемија се одвијају под ин витро условима.
• Обе технике се заснивају на антиген-антитело
• Обоје су веома брзе технике.
• Резултати техника су поновљиви.
• Обоје су побољшали квалитет података.
• Ове технике се користе у дијагностици за рак и заразне болести.

Која је разлика између имунофлуоресценције и имунохистохемије?

Имунофлуоресценција вс имунохистохемија
ИФ је техника детекције где су антитела која се користе у тесту обележена коришћењем флуоресцентних боја или флуоресцентних протеина за детекцију.	ИХЦ је техника детекције где су антитела која се користе у тесту обележена хемијским или радиоактивним елементима за детекцију.
Тачност
Тачност је већа код ИФ технике у поређењу са ИХЦ.	Тачност је нижа у ИХЦ-у.
Специфичност
АКО је специфичнији.	ИХЦ је мање специфичан.

Преглед - Имунофлуоресценција вс имунохистохемија

Молекуларни механизми су донели многе промене у пољу медицине, што је довело до напредних метода молекуларног испитивања које су донеле револуције у области дијагностике. Ови изуми су довели до брзе и тачне идентификације и потврде болести, омогућавајући на тај начин успешну администрацију и производњу лекова. Ове технике се такође користе у фармакологији да би се пронашли циљеви лекова и потврдили фармакокинетичка својства лека током метаболизма лека. ИФ и ИХЦ су две дијагностичке методе које се заснивају на концепту везивања антигена и антитела, мада се начин детекције у обе технике разликује. АКО користи принцип флуоресценције за откривање антигена, а ИХЦ користи концепт хемијске коњугације за детекцију антигена. Ово је разлика између ИФ и ИХЦ.

Преузмите ПДФ верзију Имунофлуоресценције вс имунохистохемије

Можете преузети ПДФ верзију овог чланка и користити је за оффлине употребу према напомени. Молимо преузмите ПДФ верзију овде. Разлика између имунофлуоресценције и имунохистохемије.

Референце:

1. Аоки, Валериа и др. "Директна и индиректна имунофлуоресценција." Анаис Брасилеирос де Дерматологиа, СоциедадеБрасилеира де Дерматологиа, доступан овде. Приступљено 25. августа 2017.
2. Дураииан, Јеиапрадха и др. „Примене имунохистохемије.“ Јоурнал оф Пхармаци & Биоаллиед Сциенцес, Медкнов Публицатионс & Медиа Пвт Лтд, авг. 2012, доступан овде. Приступљено 25. августа 2017.

Љубазношћу слике:

1. „Двоструко имунофлуоресцентно бојење за БрдУ, НеуН и ГФАП“ Ма М, Ма И, Ии Кс, Гуо Р, Зху В, Фан Кс, Ксу Г, Фреи ВХ 2нд, Лиу Кс. - Интраназална испорука трансформирајућег фактора раста - бета1 код мишева након можданог удара смањује волумен инфаркта и повећава неурогенезу у субвентрикуларној зони; ПМИД 19077183 (ЦЦ БИ 2.0) виа Цоммонс Викимедиа
2. „Хипоталамус мишјег ткива обојеног АБЦ-имунохистохемијом“ Аутор: заббн - Властито дело (ЦЦ БИ-СА 3.0) преко Цоммонс Викимедиа