Разлика између маркера који се бира и репортера гена

Кључна разлика - Маркер који се може бирати према Репортер Генеу
 

Техника генетског инжењеринга користи се за пренос важних гена из организма у други организам. Уметање страног гена у геном другог организма и његово изражавање унутар ћелије домаћина су најтежи кораци у преношењу гена. Да би се открио успех процеса трансформације, у рекомбинантном молекулу користе се селективни маркер и репортерски ген. Маркер који се може бирати је ДНК секвенца или ген који изражава и бира трансформисане ћелије из не-трансформисаних ћелија. Репортерски ген је други ген који се користи за разликовање трансформисаних ћелија и за квантификацију или детекцију како уметнути ген функционише унутар домаћина. Кључна разлика између селективног маркера и гена репортера је та селективни маркер користи се за скрининг не-трансформисаних ћелија и сигнализацију трансформисаних ћелија док се репортерски ген користи за квантификацију нивоа експресије гена унутар домаћина.

САДРЖАЈ
1. Преглед и кључне разлике
2. Шта је селективни маркер
3. Шта је Репортер Гене
4. Упоредна упоредба - Маркер који се може бирати вс Репортер Гене
5. Резиме

Шта је маркер који се може одабрати?

У генетском инжењерингу, интересни ген се убацује у погодан вектор и трансформише се у организме домаћине. Међутим, трансформација је успешна само у компетентним ћелијама домаћинима и постоји могућност да ће домаћинске станице одбити унос страних ДНК. Стога је важно разликовање трансформисаних и не-трансформисаних ћелија наставити са даљим експериментима. Отуда, истраживачи уграђују маркерски ген који се може бирати у вектор за лакши избор трансформисаних ћелија из не-трансформисаних ћелија. Маркер који се може бирати је ДНК секвенца, посебно ген користан у идентификацији трансформисаних ћелија. Овај маркер ген показује особину која одговара вештачком избору трансформисаних ћелија из не-трансформисаних ћелија на медијуму.

Најчешћи селективни маркери који се користе у молекуларној биологији су гени отпорни на антибиотике. Ген за резистенцију на антибиотике се убацује у вектор и трансформише се у ћелије домаћина, посебно у бактерију домаћина. Тај одређени антибиотик је уграђен у узгој бактерије. Због присуства селективног маркера, под селективним условима, могу преживети само ћелије које садрже одговарајући селектирајући маркер. Не-трансформисане ћелије нису у стању да расту у медијуму који садржи антибиотике. Због тога, захваљујући селективном маркеру који је отпоран на антибиотике, трансформисане ћелије се лако идентификују.

Гени који дају својства антиметаболитима, хербициди се користе као селективни маркери у векторима клонирања у биљном генетичком инжењерингу. Међутим, ова котрансформација селективних маркера у генетски модификоване организме има негативне ефекте на животну средину и људе. Ослобађање бактерија отпорних на антибиотике може повећати отпорност антибиотика на патогене. Може контаминирати производ или биомасу антибиотицима и изгубити селективни притисак као резултат разградње и инактивације антибиотика.

Слика 01: Вектор плазмида за пренос гена селективним маркером

Шта је Репортер Гене?

Репортер гени су гени који омогућавају детекцију или мерење експресије гена. Ови репортерски гени могу бити везани за регулаторне секвенце гена од интереса за сигнализацију места експресије или нивоа експресије. Због тога, током експресије гена под истим промотором, они се преписују у једну секвенцу мРНА и затим преводе у протеин који може указивати на ниво експресије гена.

Репортерски гени су различитих врста и садрже визуелно препознатљиве карактеристике које су обично укључене у флуоресцентне и луминесцентне протеине. Гени који кодирају флуоресцентни протеин и ензиме, претварају невидљиве супстрате у луминисцентне или обојене производе сигнализајући успешну експресију гена и пружајући прилику за квантификацију експресије гена.

Слика 02: Репортер гена

Која је разлика између селективног маркера и репортер гена?

Селектор Маркер вс Репортер Гене
Селективни маркер је врста ДНК секвенце која помаже разликовати трансформисане ћелије са не-трансформисаним ћелијама.	Репортер ген је ген који помаже квантификовати експресију жељеног гена убаченог у ћелију домаћина.
Природа произведених јединица
Гени су кодирани с карактеристикама које помажу у вјештачкој селекцији на растућим медијима.	Гени су кодирани са карактеристикама које се могу визуелно идентификовати.
Употреба
Гени отпорности на антибиотике, антиметаболитни гени, гени отпорности на хербициде итд. Су примери за селекциони маркер.	Примери гена за зелени флуоресцентни протеин, β-глукуронидазу, хлорамфеникол ацетилтрансферазу, црвени флуоресцентни протеин, итд. Су примери.

Резиме - Селектор Маркер вс Репортер Гене

Одабир маркера омогућава трансформисаним ћелијама да расту у селективном медијуму дозираном са одређеним антибиотиком или хербицидом. Користе се за рани избор трансформисаних ћелија. Репортерски гени се користе за квантификацију нивоа експресије жељеног гена који је убачен. Они такође омогућавају разликовање трансформисаних и не-трансформисаних ћелија. Ово је разлика између селективног маркера и репортера гена. И селективни маркер и репортерски ген сматрају се важним маркерима у генетском инжењерингу.

Референце:
1. Зиемиеновицз, Алицја. „Поставите селективне маркере и репортерске гене.“ СпрингерЛинк. Спрингер-Верлаг, н.д. Веб. 23. март 2017.
2. Схих, Цхен-Хан, Хсиао-Иин Цхен, Хунг-Цхиех Лее и Хуаи-Јен Тсаи. „Љубичасти хромопротеин ген служи као нови селекциони маркер за трансгенезу микроалге Нанноцхлоропсис оцулата.“ ПЛОС ОНЕ. Јавна библиотека науке, н.д. Веб. 25 мар. 2017

Љубазношћу слике:
1. „Плазмид са уметком“ Аутор: Мицхаел Јелтсцх - Властито дело (ЦЦ БИ-СА 4.0) преко Цоммонс Викимедиа
2. "Репортер ген" ТрансЦонтрол на ен.википедиа (ЦЦ БИ-СА 3.0) преко Цоммонс Викимедиа