Рекомбинација и трансформација су два кључна корака у генетском инжењерингу, где се карактеристике организма намерно мењају манипулацијом његовим генетским материјалом. Рекомбинација је процес у коме се страна ДНК уграђује у векторски геном и формира се рекомбинантни молекул ДНК. Трансформација је следећи корак у коме се рекомбинантни молекул уноси у организам домаћина. Ћелија домаћин или организам олакшава експресију рекомбинантног молекула. Кључна разлика између трансформатора и рекомбинанта је у томе што су трансформанти су ћелије или организми који узимају рекомбинантни молекул унутра и олакшавају експресију док рекомбинанти су вектори који омогућавају убацивање стране ДНК у геном и транспортују у трансформанте домаћине ради експресије.
САДРЖАЈ
1. Преглед и кључне разлике
2. Шта су Трансформанти
3. Шта су рекомбинанти
4. Упоредна упоредба - Трансформанти вс рекомбинанти
5. Резиме
Трансформанти су ћелије или организми у којима се за експресију узима рекомбинантна ДНК. Бактерије се обично користе као организми домаћини у генетском инжењерингу, јер их је лако узгајати, размножавати и руковати у лабораторијским условима, а процес трансформације је лак у поређењу са другим организмима. Најпопуларнија бактерија домаћин која се користи у генетском инжењерингу је бактерија Е цоли.
Током процеса трансформације, станице домаћина се индуцирају да преузму рекомбинанте. Међутим, неке ћелије домаћини не преузимају рекомбинантне молекуле. Познате су као нетрансформанти, а ћелије које садрже рекомбинантне молекуле ДНК познате су као трансформатори. Избор трансформатора из нетрансформаната врши се коришћењем селективних маркера у молекуларној биологији. Селективни маркери се убацују у векторски геном заједно са ДНК уметком. Често коришћени селективни маркери су гени отпорни на антибиотике. Маркерни гени олакшавају диференцијацију трансформатора и настављају процес. Након процеса трансформације, бактерија се узгаја у медијуму који садржи антибиотике. Само су трансформатори способни да расту на том медијуму пошто у себи поседују рекомбинаторе.
Једном када се рекомбинантни молекул ДНК трансформише у организму домаћина, страна ДНК се може или интегрисати у геном ћелије домаћина или остати неинтегрирана у цитоплазми. Међутим, експресија и репликација стране ДНК догађају се у организму домаћина и дају жељени резултат процеса.
Рекомбинант је организам или ћелија која поседује рекомбиновани геном који садржи страну ДНК. Рекомбинанти су резултат процеса генетског инжењеринга. Они су вештачки изграђени ин витро уметањем гена који нас занимају и модификацијом генома. Често бактеријски плазмиди и бактериофаги дјелују као рекомбинанти у генетском инжењерингу. Има химере различитих ДНК. Рекомбинантни молекул ДНК преноси страну ДНК у организам домаћина и чини га да експримира и формира жељени производ.
Рекомбинантни молекули су конструисани коришћењем рестрикционих ендонуклеза и ДН лигаза. Жељени фрагмент ДНК се одваја од оригиналног организма и убацује у вектор да би се направио рекомбинант за трансформацију. Сечење гена који нас занима и отварање векторског организма треба обавити истим рестрикционим ензимом како би се створили компатибилни лепљиви крајеви који ће их спојити заједно. Једном када се страна ДНК угради у векторски геном, позната је као рекомбинантна или рекомбинантна молекула ДНК.
Слика 02: Рекомбинантна ДНК
Трансформанти вс Рекомбинанти | |
Трансформанти су ћелије које у себи имају рекомбинантни молекул ДНК. | Рекомбинанти су молекули носачи који имају страну ДНК уметнут у сопствени геном. |
Изражавање стране ДНК | |
Они су ћелије домаћини које су у стању да експримирају рекомбинантну ДНК. | Они би требали бити у стању да се сами реплицирају у организму домаћина. |
Избор | |
Ћелије које се лако могу узгајати и множити су одабране као ћелије домаћина. | Морају се лако извући и треба садржавати маркере који се могу одабрати. |
Трансформанти су ћелије или организми са рекомбинантним молекулама ДНК унутар њих. Рекомбинанти су организми или ћелије које су прошле генетску рекомбинацију и имају страну ДНК унутар својих генома. Бактеријске ћелије се често користе као станице домаћина за трансформацију, а плазмиди и бактериофаги се често користе као вектори у рекомбинантној ДНК технологији. Ово је разлика између трансформатора и рекомбинанта.
Референце:
1. Гриффитхс, Антхони ЈФ. "Прављење рекомбинантне ДНК." Увод у генетску анализу. 7. издање Америчка национална медицинска библиотека, 01. јануара 1970. Веб. 08. април 2017
2. Цоопер, Геоффреи М. „Рекомбинантна ДНК“. Ћелија: Молекуларни приступ. Друго издање Америчка национална медицинска библиотека, 01. јануара 1970. Веб. 08. април 2017
Љубазношћу слике:
1. "Рекомбинантна формација плазмида" Минестроне Соуп на енглеској Википедији (ЦЦ БИ-СА 3.0) преко Цоммонс Викимедиа