Трансформација вс Трансфекција
Трансформација и трансфекција су две једноставне технике које се користе за увођење страног гена у ћелију домаћина. Међутим, ове технике зависе од врсте система домаћина или вектора.
Шта је ћелијска трансформација?
Трансформација је техника која се користи за уношење гена у ћелије квасца и бактерија. Ова техника обично узрокује наследне промене гена, па је експресија гена трајна. Бактеријску трансформацију је први пут увео 1928. године Фредерицк Гриффитх. Тада раних 1970-их ова техника се користила Е. цоли. Током процеса трансформације Е. цоли, ћелије су натопљене у ледено хладном раствору ЦаЦл2. Овај корак чини Е.цоли ћелије компетентне Након тога, компетентне ћелије су помешане са плазмидном ДНК и инкубиране су на леду 20-30 мин. Затим се даје кратки топлотни шок како би се омогућио пренос ДНК у ћелију. Коначно, ћелије су смештене у храњиви бујон и инкубиране на 37 ° Ц током 60-90 мин да би се успоставили плазмиди. Једном када су ови кораци успешно завршени, трансформисане ћелије могу бити смештене на погодном медијуму за размножавање ћелија. Пошто се трансформација сматра неефикасном техником, не може се користити за припрему клонских банака.
Шта је ћелијска трансфекција?
Трансфекција је метода увођења страног гена, обично, у ћелије сисара. Постоје две методе трансфекције; наиме, пролазна трансфекција и стабилна трансфекција. Код пролазне трансфекције, експресија гена је доступна ограничено време; на тај начин, промена гена изазива привремену експресију. Ова метода трансфекције је једноставна и брза; стога се може рутински користити. Један недостатак пролазне трансфекције је потешкоћа примене за велике системе синтезе протеина.
Током стабилне трансфекције, циљни ген се интегрише у геном ћелије домаћина, па је експресија гена трајна, за разлику од пролазне трансфекције.
Која је разлика између трансформације и трансфекције?
• Трансформација је увођење гена у прокариотску ћелију (бактеријске и квасце), док се трансфекција обично назива увођење гена у ћелију сисара.
• Трансформација резултира наследном променом, у генима, док трансфекција може резултирати или привременом експресијом или трајним променама гена.