Разлика између пролазне и стабилне трансфекције

Кључна разлика - Прелазно-стабилна трансфекција
 

Трансфекција је процес који је укључен у пренос гена еукариотских ћелија коришћењем хемијских или физикалних метода. Трансфекција се може класификовати у две главне врсте које се називају пролазна трансфекција и стабилна трансфекција. За време пролазне трансфекције, интересни ген се не интегрише са геном домаћина и краткотрајно се изражава унутар домаћина, док се у стабилној трансфекцији ген за интересовање интегрише са геном домаћина и дугорочно се одржава у неколико генерацијас. Ово је кључна разлика између пролазне и стабилне трансфекције. У оба случаја трансфекција је успешна, а гени се изражавају.

САДРЖАЈ
1. Преглед и кључне разлике
2. Шта је пролазна трансфекција
3. Шта је стабилна трансфекција
4. Упоредна упоредба - Прелазна вс стабилна трансфекција
5. Резиме

Шта је пролазна трансфекција?

Трансфекција је важно средство за убацивање гена у еукариотске ћелије. Међу две врсте трансфекције, пролазна трансфекција је чест начин преноса гена. Кроз вектор, страни гени се трансформишу унутар ћелија домаћина. Једном када страна ДНК уђе у ћелију домаћина, има две могућности. Може се или интегрисати са геном домаћина и реплицирати, или остати унутра, без интегрисања у геном. Привремена трансфекција показује привремену експресију уметнутих гена без интегрисања у геном домаћина. Гени експримирају и производе кодирани протеин док се ћелија не подели. Међутим, због немогућности интеграције, не може се поновити и ући у будуће генерације. Ова врста трансфекције је успешна за кратак временски период. Током деобе ћелије или због неких других фактора, страна ДНК се подвргава деградацији. Привремена трансфекција је приказана када је страна ДНК у облику високо замотане ДНК.

Слика 01: Пролазна трансфекција

Шта је стабилна трансфекција?

Стабилна трансфекција показује успешну интеграцију страних гена у геном домаћина. Једном када страна ДНК уђе у ћелију домаћина, део стране ДНК се интегрише са геном домаћина и постаје њен део. Дакле, страна ДНК се такође реплицира и прелази у будуће генерације када се геном домаћина реплицира. Ова врста трансфекције је сложена и ретка. Међутим, због стабилне трансфекције у геном, ова особина се одржава у дужем периоду од неколико генерација.

Стабилна трансфекција је тежак процес и захтева ефикасну испоруку ДНК и ћелијско прикупљање стране ДНК у њен геном. Стога линеарна ДНК фаворизира стабилну трансфекцију од кружне ДНК. Међутим, стабилна стопа трансфекције је отприлике једна од 10⁴ трансформисане ћелије. Стабилна трансфекција може се посматрати истодобним изазивањем селективног маркера и извођењем вештачке селекције на медијуму.

Слика 02: Стабилна трансфекција

Која је разлика између пролазне и стабилне трансфекције?

Прелазно-стабилна трансфекција
Страни ДНК се не интегрише у геном домаћина.	Страни ДНК се интегрише са геном домаћина и постаје његов дио.
Репликација у оквиру домаћина
Пролазно трансфицирани гени се не реплицирају унутар домаћина. Због тога се гени не преносе на следеће генерације.	Гени се реплицирају унутар домаћина и преносе на будуће генерације.
Време трајања израза гена
Гени се изражавају на временски ограничен период и након тога се уништавају.	Гени постају део генома и изражавају се унутар генерације током дужег временског периода.
Употреба
Ово је корисно за проучавање ефеката краткотрајне експресије гена или генских производа.	Ово је корисно за дугорочно проучавање ефеката експресије гена.
Детекција трансфекције
Гени су експримирани и могу се лако открити уметањем репортера гена.	Стабилна трансфекција се може лако открити уметањем селектираног маркера и избором вештачким одабиром на медијуму.
Појава и процес
Пролазна трансфекција је уобичајена и није комплексна за извођење.	Стабилна трансфекција је ретка и комплексна је за извођење.
Природа ДНК
Јако прекривена ДНК погодна је за пролазну трансфекцију.	Линеарна ДНК је погодна за стабилну трансфекцију.
Апликације
Ово се користи за студије оборења гена или пригушивања инхибицијским РНА, производњом протеина у малом обиму	Ово се користи за производњу протеина на великим, дугорочним фармаколошким студијама, генској терапији, истраживању механизама дугорочне генетске регулације

Преглед - Прелазно-стабилна трансфекција

Пролазне и стабилне трансфекције су две врсте трансфекција које су приказане током преноса гена у еукариотске ћелије системима који нису засновани на вирусу. Трансформисана страна ДНК није интегрисана са геном домаћина у пролазној трансфекцији, док се интегрира са геном домаћина у стабилну трансфекцију. Кружно намотана ДНК је приказана пролазном трансфекцијом док линеарна ДНК преферира стабилну трансфекцију. Ово је разлика између пролазне и стабилне трансфекције. Међутим, пролазна трансфекција је чешћа и лакша у поређењу са стабилном трансфекцијом. Али избор једног од два зависи од сврхе преноса гена и трајања истраживачког пројекта.

Референце:
1. Цондреаи, Ј. Патрицк, Сам М. Витхерспоон, Виллиам Ц. Цлаи и Тхомас А. Кост. „Пролазна и стабилна експресија гена у ћелијама сисара трансдуцирана је рекомбинантним бакуловирусним вектором.“ Зборник радова Националне академије наука Сједињених Америчких Држава. Национална академија наука, 05. јануара 1999. Веб. 25 мар. 2017
2. Ким, Тае Киунг и Јамес Х. Ебервине. "Трансфекција ћелија сисара: садашњост и будућност." Аналитичка и биоаналитичка хемија. Спрингер-Верлаг, авг. 2010. Веб. 25 мар. 2017