Разлика између директне и индиректне ЕЛИСА

Кључна разлика - Директна вс индиректна ЕЛИСА
 

Ензимски имуно тест (ЕЛИСА), такође познат као ензим имуно тест, је серолошки тест који открива антитела у крви. Користи се као дијагностички алат за откривање да ли је пацијент био изложен одређеној врсти вируса или другом инфективном агенсу (антигену) и да ли је тело произвело антитела против инфекције. ЕЛИСА такође може да идентификује прошле и тренутне инфекције. Отуда, ЕЛИСА лекари често користе тест претходног тестирања пре дубинске анализе болести. Овај тест се може обавити у лабораторији узимањем узорка крви од пацијента. Постоје две врсте ЕЛИСА теста: директна ЕЛИСА и индиректна ЕЛИСА. Кључна разлика између директне и индиректне ЕЛИСА је та индиректна ЕЛИСА је осетљивија и захтева додавање секундарног антитела док директна ЕЛИСА је мање осетљива и користи само примарно антитело.

САДРЖАЈ
1. Преглед и кључне разлике
2. Шта је Дирецт ЕЛИСА
3. Шта је индиректна ЕЛИСА
4. Упоредна упоредба - Директна вс Индиректна ЕЛИСА
5. Резиме

Шта је директна ЕЛИСА?

ЕЛИСА је дијагностички тест болести који се обавља како би се утврдило присуство одређених антигена или антитела у крви. Изводи се као плоча. Користи антитела повезана са лако испитиваним ензимима. Присуство антигена у узорку серума везује се за специфична антитела повезана са ензимима. У завршном кораку додаје се специфичан супстрат који реагује са ензимом. Ензим претвара супстрат у обојени производ или производи сигнал. Промјена боје у хемијској подлози открива присуство одређеног антитела у узорку серума. Директни тест ЕЛИСА користи само примарно антитело везано за ензим. Везујући се са антигеном, он брзо мења боју, што указује на присуство инфективног агенса у крви. Међутим, интензитет сигнала је слабији код директног ЕЛИСА обзиром да су епитопи ограничени на везивање антигена. Дакле, директна ЕЛИСА је мање осетљива у поређењу са индиректном ЕЛИСА.

Слика 01: Директни тест ЕЛИСА

Шта је индиректна ЕЛИСА?

ЕЛИСА се може извести коришћењем две врсте антитела, наиме; примарно антитело и секундарно антитело. Индиректни ЕЛИСА алат користи обе врсте антитела да појача сигнале за бољу детекцију. Индиректна ЕЛИСА техника се изводи на следећи начин.

1. Плоче се инкубирају са антигенима и исперу да блокирају неспецифично везивање.
2. Затим су додата примарна антитела и испрана.
3. Додају се и исперу секундарна антитела везана за ензим.
4. Додаје се супстрат и остави се да реагује са ензимима.
5. Откривају се сигнали и утврђује се присуство или одсуство специфичног антигена у узорку.

У индиректном ЕЛИСА тесту, неколико секундарних антитела се може везати за једно примарно антитело. Секундарна антитела повезана су са лако испитиваним ензимима. Због тога једно везивање може да створи јак сигнал због више интеракција. Дакле, индиректна ЕЛИСА је осетљивија од директне ЕЛИСА. Међутим, индиректна ЕЛИСА може да даје неспецифичне сигнале због укрштених реакција секундарних антитела.

Слика 02: Индиректни тест ЕЛИСА

Која је разлика између директне и индиректне ЕЛИСА?

Директна вс индиректна ЕЛИСА
Директна ЕЛИСА је мање осетљива у поређењу са индиректном ЕЛИСА.	Индиректна ЕЛИСА је осетљивија.
Време које
Директни тест ЕЛИСА је брз процес.	Индиректна ЕЛИСА захтева много времена.
Употреба антитела
У директној ЕЛИСА користи се само једна врста антитела (примарна антитела).	Примарна и секундарна антитела се користе за индиректну ЕЛИСА.
Веза са ензимима
Примарна антитела су повезана са ензимима.	Секундарна антитела су повезана са ензимима.
Унакрсна реактивност других антитела
Директна ЕЛИСА елиминише унакрсну реактивност других антитела.	Индиректна ЕЛИСА утиче на унакрсну реактивност других антитела.
Сигнали
Сигнали су слаби у поређењу са индиректним ЕЛИСА.	Сигнали се појачавају у индиректном ЕЛИСА-у. Отуда је то лако открити.

Преглед - Директна вс Индиректна ЕЛИСА

ЕЛИСА је биохемијска техника која се углавном користи у имунологији да би се открило присуство антитела или антигена у узорку крви пацијента. Може се извести преко два процеса позната као директна или индиректна ЕЛИСА. Директни тест ЕЛИСА користи само примарна антитела за детекцију антигена, док индиректна ЕЛИСА користи и примарна и секундарна антитела. У директном ЕЛИСА обележена су примарна антитела док су код индиректних ЕЛИСА обележена секундарна антитела. Ово је разлика између директне и индиректне ЕЛИСА.

Референце
1. "Анализа имуногорбентом везаног за ензим (ЕЛИСА)." Билтен Светске здравствене организације. Америчка национална медицинска библиотека, 1976. Веб. 29 мар. 2017
2. Лоон, А. М ван, Ј. Т Ван Дер Логт, Ф. В. Хеессен и Ј. Ван Дер Веен. „Ензимски имуносорбент тест који користи обележени антиген за откривање имуноглобулина М и А антитела у токсоплазмози: поређење са индиректном имунофлуоресценцијом и двоструким сендвич тестом имуносорбента.“ Часопис за клиничку микробиологију. Америчка национална медицинска библиотека, јун 1983. Веб. 29 мар. 2017

Љубазношћу слике:
1. „ЕЛИСА-дијаграм“ Цавитри - Властито дело (ЦЦ БИ 3.0) преко Цоммонс Викимедиа 
2. „Индиректна ЕЛИСА“ Цаванг - сопствени рад (ЦЦ0) преко Цоммонс Викимедиа