Разлика између танког слоја папира и кроматографије на колони

Кључна разлика - папир против танког слоја вс Ступац Хроматографија
 

Хроматографија на папиру, танкослојна хроматографија и хроматографија на колони су три врсте хроматографских техника. Тхе кључна разлика Између папирне хроматографије, танкослојне хроматографије и колонске хроматографије заснива се на врсти стационарне фазе која се користи у техници хроматографије. Папирна хроматографија користи целулозни папир као стационарну фазу, танкослојна хроматографија користи глиницу или силика гел као стационарну фазу, док колонаста хроматографија користи ступац препун погодног материјала за матрицу као стационарну фазу.

У процесу одвајања и идентификације биомолекула попут протеина и угљених хидрата, хроматографија је важна примењена биофизичка техника. Хроматографија раздваја једињења на основу њихове растворљивости, величине и набоја. На основу механизма раздвајања, хроматографија користи механизме попут ионске размене, апсорпције, одвајања партиција и величине и постоје три хроматографске технике; наиме папир, танки слој и кроматографија на колони. Хроматографија на папиру заснива се на адсорпцији чврсто-течне и растворљивости једињења, а као стационарну фазу користи целулозни папир. Танкослојна кроматографија заснива се на адсорпцији молекула чврсто-течно. Има стационарну фазу која се обично прави од глинице или силикагела и мобилну фазу која је растварач. Колона-кроматографија користи колону напуњену матрицом која се користи за одвајање молекула углавном на основу њихове величине, афинитета или набоја.

САДРЖАЈ

1. Преглед хроматографије и кључне разлике
2. Шта је папирна хроматографија
3. Шта је хроматографија танког слоја
4. Шта је хроматографија на колони
5. Сличности између папирне, танке слојеве и кроматографије на колони
6. Упоредно упоређивање - папир у односу на танки слој и кроматографију на колони у табеларном облику
7. Резиме

Шта је папирна хроматографија?

Хроматографија на папиру је најједноставнија врста хроматографије која се користи и не користи се за опсежна истраживања. Углавном се користи у студентским лабораторијама за идентификацију биомолекула попут аминокиселина и угљених хидрата присутних у смешама. Хроматографија папира користи стационарну фазу која се прави помоћу целулозног папира или Вхатман филтрирајућег папира и покретну фазу која се обично припрема помоћу органских растварача као што је н-бутанол итд. Стационарна фаза је засићена водом, а стационарна фаза је течна. Стога, када се једињења примете и оставе да раде у присуству покретне фазе, у зависности од растворљивости једињења, раздвајају се. Према томе, након развијања хроматограма, може се извршити бојење како би се одредила дужина трајања сваког једињења. Стога се може израчунати ретенциони фактор.

Слика 01: Хроматографија на папиру

Хроматографија на папиру може се даље класификовати као узлазна папирна хроматографија и силазна папирна хроматографија у зависности од правца текућег растварача.

Шта је хроматографија танких слојева?

Танкослојна хроматографија или ТЛЦ је уобичајена техника за идентификовање различитих аминокиселина присутних у смеши или за идентификацију протеина. Техника раздвајања заснива се на адсорпцији чврста-течна. Током танкослојне хроматографије, плоча направљена од глинице или силикагела користи се као стационарна фаза. Мешавина растварача варира у зависности од захтева и могу да користе различите комбинације органских једињења као што су н-бутанол, сирћетна киселина и вода да се припреми растварач. Једињења која се одвајају налазе се на плочи и урањају у смешу растварача. Једном када растварач пређе на основу капиларног деловања плоче, једињења која се примете на плочи такође се крећу у зависности од њихове растворљивости у растварачу..

Слика 02: Танка слојна хроматографија

Откривање места након хроматограма се изводи различитим поступцима бојења. Неки користе обојење нинхидрином, што је прилично токсична метода бојења. Савремени хроматограми у танком слоју користе флуоресцентне технике да би се приказао хроматограм након покретања. У зависности од удаљености коју је прешао, може се израчунати време задржавања сваког једињења. Ово се може користити за идентификацију врсте раздвојеног једињења на основу коришћене смеше. ТЛЦ се углавном користи за идентификацију аминокиселина у протеинској смеши и такође за одвајање различитих врста моносахарида присутних у смеши.

Шта је хроматографија на колони?

Колона-кроматографија је широк појам који се користи за описивање многих врста хроматографских техника које користе методу одвајања засновану на колони. У хроматографији на колони користи се физичка колона са материјалом за паковање да би се одвојила једињења. Одвајање се може заснивати на различитим физичким својствима која једињења показују. Ова својства могу бити набој, величина, 3Д конформација и капацитет везивања, итд. Дакле, ступац набијен материјалом матрице делује као стационарна фаза, а пуфер за прање примењен на колону делује као покретна фаза.

Ако су молекули раздвојени на основу величине, материјал за паковање се пакује на начин да оставља поре да једињења могу пролазити кроз њих. Дакле, већи молекули који не могу тећи кроз поре прво се елуирају, док мањим молекулама треба много дуже времена да се елуирају..

Слика 03: Хроматографија на колони

Ако се молекули одвоје на основу њиховог набоја, стационарна фаза ће садржати или анионски или катионски измењивач коме ће једињења бити привучена на основу њиховог набоја. Тако ће током корака прања невезана једињења бити елуирана. Након додавања пуфера за елуцију, везана наелектрисана једињења ће се елуирати. Детекција ових елуента углавном се заснива на спектрофотометријским техникама.

Које су сличности између папирног танког слоја и кроматографије на колони?

• Све папирне танкослојне и колонасте хроматографије користе се три технике за одвајање биомолекула попут аминокиселина, протеина и угљених хидрата.
• Технике папирне хроматографије у танком слоју и на колони имају покретну и стационарну фазу.
• Технике папирне хроматографије у танком слоју и на колони користе биофизичке механизме за раздвајање.

Која је разлика између танког слоја папира и кроматографије на колони?

Папер вс Тхин Лаиер вс Цолумн Цхроматограпхи
Хроматографија на папиру	Хроматографија на папиру је хроматографска техника која се користи за одвајање једињења на основу адсорпције течност-течност и растворљивости једињења. Као стационарну фазу користи целулозни папир.
Хроматографија танког слоја	Танкослојна кроматографија је друга хроматографска техника заснована на адсорпцији молекула чврсто-течно. Има стационарну фазу направљену од глинице или силикагела и растварач као покретну фазу, која је растварач.
Хроматографија на колони	Колона-кроматографија користи колону напуњену матрицом која се користи за одвајање молекула углавном на основу њихове величине, афинитета или набоја.
Стационарна фаза
Хроматографија на папиру	Папир направљен од нитроцелулозе Вхатмана користи се као стационарна фаза у папирној хроматографији.
Хроматографија танког слоја	Као стационарна фаза танкослојне хроматографије користи се глиница или силика гел.
Хроматографија на колони	Колона набијена погодним материјалом за паковање користи се као стационарна фаза у кроматографији на колони.
Покретна фаза
Хроматографија на папиру	Текући растварач је покретна фаза папирне хроматографије.
Хроматографија танког слоја	Текући растварач је покретна фаза танкослојне хроматографије.
Хроматографија на колони	Пуфер за прање је покретна фаза хроматографије на колони.
Механизми који се користе за раздвајање
Хроматографија на папиру	Хроматографија на папиру заснива се на апсорпцији чврсто-течне.
Хроматографија танког слоја	Танкослојна кроматографија заснива се на апсорпцији чврсто-течне.
Хроматографија на колони	Хроматографија на колони заснива се на искључењу величине, наелектрисања и облика.
Елуциони пуфер
Хроматографија на папиру	Не захтева се папирном хроматографијом.
Хроматографија танког слоја	Није потребно за танкослојну хроматографију.
Хроматографија на колони	Потребно је колонском хроматографијом.
Детекција
Хроматографија на папиру	Бојење и одређивањем задржавајућег фактора.
Хроматографија танког слоја	Бојење и одређивањем задржавајућег фактора.
Хроматографија на колони	Спектрофотометријско одређивање.

Резиме - Папер Тхин Лаиер вс Ступац Хроматографија

Папирна хроматографија, ТЛЦ и кроматографија на колони су технике раздвајања које се користе за одвајање биомолекула попут протеина, аминокиселина и угљених хидрата (углавном моносахарида). Папирна хроматографија користи целулозни папир као стационарну фазу, а механизам раздвајања заснован је на адсорпцији чврстих и течних. ТЛЦ такође користи адсорпционе механизме чврста-течна. Молекули су раздвојени на стационарној фази, зависно од њихове растворљивости у покретној фази. Колона-кроматографија користи физичка својства као што су величина, облик, набој и молекулска тежина једињења. Колона напуњена материјалом матрице делује као стационарна фаза, док пуфер за прање делује као фаза растварача. Ово је разлика између папирног танког слоја и кроматографије на колони.

Референце:

1.Кларк, Јим. " ХРОМАТОГРАФИЈА ТАНКОГ СЛОЈА." Хроматографија танких слојева, 2007. Доступно овде 
2.Цоскун, Озлем. "Технике раздвајања: хроматографија." Нортхерн Цлиницс оф Истанбул, Каре Публисхинг, 2016. Доступно овде 

Љубазношћу слике:

1. „Резервоар за хроматографију“ (ЦЦ БИ-СА 3.0) преко Цоммонс Викимедиа  
2. 'Слијед тл-а' од Куантоцкгоблин, (Публиц Домаин) преко Цоммонс Викимедиа
3. 'Хроматографија колумне' (Публиц Домаин) путем Цоммонс Викимедиа