Разлика између РТ-ПЦР и КПЦР

Ланчана реакција реверзне транскрипцијске полимеразе (РТ-ПЦР)

РТ-ПЦР вс. КПЦР

Напредак у биотехнологији резултирао је откривањем неколико начина да се носи са потребама трансплантације органа током година. Пре тога, особа која би добровољно донирала било који орган одмах након смрти пацијенту у потреби, могла је само да започне операцију трансплантације. Непрекидне студије и истраживања биолога доводе до открића матичних ћелија.

Матичне ћелије се односе на оне које су узете из ДНК ембриона, а које ће служити као извор за регенерацију ћелија који би у основи био клон органа у коме је пронађена ДНК. Иако активисти за људска права лобирају за заустављање таквих поступака, успјешне операције заиста су доказале ефикасност развоја матичних ћелија у трансплантацији органа..

Пре него што неко може да процени и у потпуности разуме матичне ћелије, постоји потреба да се упознамо са различитим терминологијама повезаним са овим научним открићем. Узгојем матичних ћелија бави се ДНК и његово кодирање. Према томе, за студенте или било које особе заинтересоване за ту област важно је да разликују РТ-ПЦР и кПЦР.

Ланчана реакција реверзне транскрипције полимеразом (РТ-ПЦР) једна је од многих варијанти ланчане реакције полимеразе, или ПЦР. Ова лабораторијска техника се широко користи у молекуларној биологији како би научници произвели вишеструке копије одређене ДНК секвенце процесом скованим као „амплификација“. Разлика између РТ-ПЦР и традиционалног ПЦР је та што се РНА прво преписује натраг у свој ДНА комплемент, који користи реверзну транскриптазу. Нова комплементарна ДНК која садржи обрнуту транскрипцију биће потом амплификована коришћењем традиционалног ПЦР или ПЦР у реалном времену..

Већина студената који проучавају овај поступак често чине грешку у замјени ПЦР-а са реверзном транскрипцијом и у стварном времену, јер су ова два скраћено на сличан начин. Да не би дошло до забуне, биолози означавају ПЦР у реалном времену као квантитативни ПЦР у реалном времену или кПЦР.

КПЦР се увелике разликује од РТ-ПЦР-а, јер је кПЦР одговоран за мерење појачања у тренутку када се догађа. Може се рећи да РТ-ПЦР покреће процес амплификације, док кПЦР мери то што се поступак одвија.

Квантитативни ПЦР у реалном времену

КПЦР је заправо променио традиционални метод једносмерног приступа када је реч о квантификацији ДНК и РНК, пошто примена кПЦР методе омогућава биолозима да утврде почетну концентрацију нуклеинске киселине и пре него што се примете резултати реакције и Прибележио.

Примена кПЦР-а, који се данас сматра најмоћнијом и најосетљивијом техником анализе за генетичке студије, значајно се проширила. Тренутно је укључен у квантитативну анализу експресије гена, генотипизацију, детекцију патогена и анализу СНП-а, заједно са мерењима РНА интерференције..

КПЦР се често комбинује са процесом обрнуте транскрипције за квантификацију мессенгер РНА и МицроРНА присутних у ћелијама ткива које су посматране и са којима се експериментише. То онда даје још једну видљиву разлику између ова два: РТ-ПЦР се може користити за процес амплификације, али за квантитативну сврху треба да буде спојен кПЦР-ом.

Такође се зна да је КПЦР квантитативнији, јер се подаци могу прикупљати како фаза експоненцијалног раста (лог) ПЦР-а напредује. Биолози напомињу да је количина нуспродукта ПЦР-а директно пропорционална количини нуклеинске киселине предлошке која ће се мерити помоћу кПЦР.

С друге стране, РТ-ПЦР је далеко од квантитативне природе јер поштовање интензитета појачаног појаса на гелу следи постављеном стандарду концентрације може довести до „полуквантитативног“ закључка.

Резиме:

1.КПЦР и РТ-ПЦР су оба термина која се користе у биотехнологији и користе се за производњу вишеструких копија ДНК.
2.РТ-ПЦР се користи за појачавање обрнуте транскрипције ДНК кода; КПЦР мери појачање.
3.РТ-ПЦР је за појачавање, док је кПЦР за квантификацију.
4.КПЦР је квантитативне природе, док РТ-ПЦР није.