Изрази слагање гела и гел за раздвајање користе се у објашњавању СДС-ПАГЕ технике. СДС-ПАГЕ или електрофореза натријум додецил сулфат-полиакриламид гела је лабораторијска техника која се користи за одвајање молекула протеина на основу њихове молекулске тежине. Теорија иза технике је да протеини различите молекулске тежине показују различите стопе миграције; Молекули мале молекулске тежине мигрирају брже док молекули велике молекуларне тежине мигрирају споро. Медијум за миграцију је гел. Постоје две врсте гелова названих гелом за слагање и гелом за раздвајање. Тхе кључна разлика између гела за слагање и гела за одвајање је то пХ гела за слагање је 6,8 док је пХ гела за раздвајање 8,8.
1. Преглед и кључне разлике
2. Шта је гел за слагање
3. Шта је раздвајајући гел
4. Однос између гела за слагање и гела за раздвајање
5. Упоредна упоредба - Глагање гела против гела за раздвајање у табеларном облику
6. Резиме
Гел за слагање је ниско концентровани полиакриламидни гел који се поставља на врх концентрованијег раздвајајућег гела (гел за одвајање) у СДС-ПАГЕ техници. Гел за слагање се користи за побољшање разлучивости електрофорезе. Резолуција се повећава због разлике између концентрација гела за слагање и гела за раздвајање који утичу на протеине у узорку. Пошто је концентрација полиакриламида у гелу за слагање мала, величина пора је већа. Ово такође помаже у повећању одвојености.
Глаг за слагање је лабав полиакриламидни гел са великим порама од око 7% полиакриламида. Ове поре не делују као значајна баријера за велике молекуле протеина. Отуда овај гел мало утиче на покретљивост тих протеина. Ово чини раздвајање према покретљивости и величини протеина концентрацијом између два гела.
Слика 01: СДС-ПАГЕ акриламидни гел
ПХ гела за слагање је 6,8. Његов пХ је киселији од пХ разблаживања за 2 пХ јединице. Овај пХ подразумева нижу јонску снагу, а самим тим и већи електрични отпор. Ово изазива покретљивост протеина од осталих набијених честица које се налазе у гелу.
Гел за раздвајање или гел за раздвајање СДС-ПАГЕтецхникуе-а је високо концентровани полиакриламидни гел који се поставља на врх ниско концентрованог гела за слагање. Гел за раздвајање садржи велику количину полиакриламида (10%). ПХ овог гела се одржава као пХ = 8,8, што је већи ниво пХ од пХ гела за слагање.
Слика 02: Апарат за електрофорезу у гелу
Када протеински молекули дођу до раздвајајућег гела, миграција тих молекула се успорава, јер је сепарацијски гел гела велике концентрације мале величине поре који може деловати као значајна баријера за кретање протеинских молекула. Ово успоравање омогућава осталим протеинима да полако мигрирају да би се надокнадили, што резултира уском концентрованом траком између два гела.
Слагање гела вс одвајајући гел | |
Гел за слагање је ниско концентровани полиакриламидни гел који се поставља на врх концентрованијег раздвајајућег гела (гел за одвајање) у СДС-ПАГЕ техници. | Одвајајући гел или гел за раздвајање СДС-ПАГЕ технике је високо концентровани полиакриламидни гел који се поставља на врх ниско концентрованог гела за слагање. |
Постављање | |
Гел за слагање се ставља на раздвајајући (раздвајајући) гел. | Гел за одвајање се поставља на дно посуде која се користи за електрофорезу гела. |
Концентрација | |
Концентрација гела за слагање је висока. | Концентрација раздвајајућег гела је ниска. |
Садржај полиакриламида | |
Гел за слагање садржи око 7% полиакриламида. | Гел за раздвајање садржи око 10% полиакриламида. |
пХ | |
ПХ гела за слагање је 6,8. | ПХ гела за раздвајање је 8.8. |
Величина пора | |
Велике величине пора присутне су у гелу за слагање. | Мале величине пора присутне су у сепарацијском гелу. |
Резолуција | |
Гел за слагање даје бољу резолуцију. | Гел за одвајање даје лошу резолуцију. |
Гел за слагање и гел за раздвајање две су врсте полиакриламидних гелова који се користе за боље одвајање протеинских молекула у датом узорку. Разлика између гела за слагање и гела за одвајање је што је пХ гела за слагање 6,8 док је пХ гела за раздвајање 8,8.
1. "Полиакриламид гел електрофореза." Полиакриламид гел електрофореза (теорија): Молекуларна биологија, виртуелни лабораториј ИИ: Биотехнологија и биомедицинско инжењерство: Амрита Висхва Видиапеетхам Виртуал Лаб. Доступно овде
2. „Како функционише СДС-ПАГЕ“. Битесизе Био, 16. фебруара 2018. Доступно овде
3. „СДС-ПАГЕ гел за слагање - БИЦХ 608 (Полименис-Петтигрев).“ Гоогле веб локације. Доступно овде
1.'СДС-ПАГЕ Ацриламиде гел'Би Бенсаццоунт на енглеској Википедиа, (ЦЦ БИ 3.0) преко Цоммонс Викимедиа
2. 'Апарат за геле електрофорезе' Аутор: Јеффреи М. Виноцур - Властити рад, (ЦЦ-БИ 2.5) преко Цоммонс Викимедиа